中图分类：TQ921

学科分类：180.71

成果类别：应用技术

成果水平：未评价

研究起止时间：2009-07～2012-06

评价形式：验收

(1)课题来源与背景 本课题为2009年度海南省自然科学基金资助研究课题（基金编号509003） （2）技术原理及性能指标 本课题通过物理诱变和化学诱变相结合的方式,选育到1株能产高分子量透明质酸的菌株SH0201,传代7次后,无溶血性,且HA的分子量稳定在2.0×106Da以上,达到药用级HA所需的分子量要求。 （3）技术的创造性与先进性 目前微生物发酵法生产透明质酸所用菌种Streptococcus equi,在其菌株生长中一大缺陷是产生链球菌溶血素,对人体有毒副作用,另一缺陷是它们在发酵中产生含有降解HA的透明质酸酶,影响高分子量HA的积累。本项目通过诱变选育到无溶血性、透明质酸酶缺陷型,产高分子量HA的菌种。本项目中采用X射线诱变前,加入“增敏剂”5-BU,在国内外相关文献中未见报道;同时在筛选方法中加入溶血性检测,考虑了生物安全性。该方法为选育优良高分子量HA产生菌提供了新思路。 （4）技术的成熟程度,适用范围和安全性 通过物理和化学诱变选育产高分子量透明质酸的菌株,可突破国外专利保护的壁垒,对促进药用级透明质酸在我国的研究、生产和利用,降低对国外产品的进口依赖具有重要意义。 本研究中采用X射线诱变前,加入“增敏剂”5-BU,在国内外相关文献中未见报道;同时在筛选方法中加入溶血性检测,充分考虑了生物安全性。该方法为选育优良高分子量HA产生菌提供了新思路。 （5）项目实施的成效及存在问题和改进意见 本课题的实施所得菌种,为药用级透明质酸的研究、生产和利用提供菌种基础,具有重要意义。 存在的问题是：由于经费有限,导致本课题完成时有关菌种的毒性及稳定性实验还没有深入进行。因此,准备继续开展后续工作,获取该菌在毒性试验和稳定性实验上的完整数据,为后续发酵条件的优化和工业化发酵生产高质量的HA奠定坚实的基础。